Im ersten Ableger war man noch mit dem Meuchelmörder Altair zum größten Teil im Jahre 1193 in der Stadt Jerusalem unterwegs, in der Fortsetzung verschlägt es euch ca. 280 Jahre später nach Italien, wo derweil die Epoche der Renaissance angebrochen ist.
Ihr seid in Venedig, der Toskana und Florenz unterwegs, auf der Suche nach euren Zielpersonen. Die Städte sollen um Einiges größer als noch im Vorgänger ausfallen, Venedig hat beispielsweise die doppelte Ausdehnung von Jerusalem, dem Schauplatz des ersten Teils, und besteht aus insgesamt fünf verschiedenen Bezirken. Warum gerade diese drei italienischen Metropolen und Landstriche ausgewählt wurden, begründet das Entwicklerteam damit, dass es neben Rom die bekanntesten Orte Italiens sind und die Städte durch ihre Architektur eine perfekte Grundlage bieten, um das Spielgeschehen realistisch darzustellen.